首页 | 期刊介绍 | 编委会 | 道德声明 | 投稿指南 | 常用下载 | 过刊浏览 | In English
引用本文:陈 军,崔红利,赵佳琳,秦 松.凯氏拟小球藻己糖激酶基因的克隆及其在不同培养条件下的表达分析[J].海洋科学,2017,41(7):1-8.
【打印本页】   【HTML】   【下载PDF全文】   查看/发表评论  下载PDF阅读器  关闭
←前一篇|后一篇→ 过刊浏览    高级检索
本文已被:浏览 1836次   下载 1573 本文二维码信息
码上扫一扫!
分享到: 微信 更多
凯氏拟小球藻己糖激酶基因的克隆及其在不同培养条件下的表达分析
陈 军1,2, 崔红利3, 赵佳琳1,2, 秦 松1
1.中国科学院 烟台海岸带研究所 海岸带生物学与生物资源利用重点实验室;2.中国科学院大学;3.大连大学 生命科学与技术学院
摘要:
为研究凯氏拟小球藻(Parachlorella kessleri)糖代谢分子机制, 本研究采用RT-PCR和RACE技术从凯氏拟小球藻中克隆了己糖激酶基因CkeHK(GenBank ID: AHF54566), 并对其自养、异养、混养条件下的转录表达进行分析。结果表明, 该序列的cDNA全长为1 844 bp, 开放阅读框1 389 bp, 编码462个氨基酸。该蛋白的相对分子质量为49.73, 等电点为6.98。实时荧光定量PCR结果显示, 以自养培养条件为对照, 异养培养和混养培养条件下, CkeHK均能够发生明显上调, 且混养条件下上调量比异养条件下上调量更多, 说明CkeHK可能在凯氏拟小球藻利用外源糖的过程发挥重要作用, 并且光信号对于凯氏拟小球藻利用外源糖可能存在调控作用。这些研究结果为进一步阐明CkeHK的功能及其作用机制奠定了分子基础。
关键词:  凯氏拟小球藻(Parachlorella kessleri)  己糖激酶  基因克隆  表达分析
DOI:10.11759/hykx20170225001
分类号:
基金项目:国家重点研发计划项目(2016YFF0202304); 国家自然科学基金面上项目(41376139); 烟台市科技计划项目(2016JHZB007)
Molecular cloning of hexokinase from Parachlorella kessleri and its expression analysis under different trophic modes
CHEN Jun,CUI Hong-li,ZHAO Jia-lin,QIN Song
Abstract:
cDNA (GenBank ID: AHF54566) encoding hexokinase (termed CkeHK) from the green alga Parachlorella kessleri was cloned and sequenced to understand the response to the presence and uptake of glucose at the molecular level. The transcriptional expression patterns of CkeHK were observed under phototrophic, heterotrophic, and mixotrophic culture conditions. The results indicated that the CkeHk cDNA was 1, 844 base pairs (bp) long, with an open reading frame (ORF) of 1 389 bp encoding 462 amino acids, with a calculated molecular mass of 49.73 kDa and an estimated isoelectric point of 6.98. Under the phototrophic condition as control, the transcriptional profiles of CkeHk showed that it could be upregulated under the heterotrophic and mixotrophic culture conditions. The mRNA level of CkeHK under the mixotrophic culture condition could be upregulated more than that under the heterotrophic culture condition. These results suggest that light may play an important role in regulating the role of hexokinase in metabolizing exogenous glucose. These findings provide us valuable information for exploring the mechanism of metabolizing glucose in P. kessleri.
Key words:  Parachlorella kessleri  hexokinase  molecular clone  transcript expression
版权所有 《海洋科学》 Copyright©2008 All Rights Reserved
主管单位:中国科学院 主办单位:中国科学院海洋研究所
地址:青岛市市南区福山路32号  邮编:266071  电话:0532-82898755  E-mail:marinesciences@qdio.ac.cn
技术支持:北京勤云科技发展有限公司